Close

Air-Dryable Direct DNA and RNA/DNA qPCR Stool

Air-Dryable Direct DNA qPCR and RNA/DNA qPCR Stool mixes are glycerol-free and contain optimized excipients compatible with air and oven drying. The mixes have been designed for the direct detection of DNA and RNA from stool specimens without extraction.

Can also be used wet and/or with purified nucleic acid

Request a Sample

对产品有疑问吗?

欢迎联系我们了解更多迈迪安分子和免疫的产品系列!

联系专家团队

Air-Dryable Direct DNA qPCR Stool, MDX140

Available in 5 mL (1,000 Rxn) or 50 mL (10,000 Rxn) aliquots

 

Air-Dryable Direct RNA/DNA qPCR Stool, MDX141

Available in 5 mL (1,000 Rxns) or 50 mL (10,000 Rxns) aliquots

粪便中存在的PCR抑制物,如胆盐、多糖、血红素和代谢产物,是DNA/RNA直扩的挑战。此外,由于粪便样本的高度复杂性和异质性,通常需要对样本进行预处理以去除其中可能存在的干扰物质,如食物残渣、微生物、脱落的上皮细胞和粘液。可风干粪便直扩qPCR/RT- qPCR预混液是专门为粪便样本直扩开发的配方,可减少样本的处理步骤。该试剂含有优化的添加剂对抑制物有更强的耐受性,同时可保持样本的质量和完整性。 它具有更短样本检测周转时间、更高灵敏度以及更长保质期的特点,能满足对胃肠道疾病快速、无创检测日益增加的需求。如果您正在开发寄生虫、病毒、细菌的感染性疾病检测,或炎症性肠病或胃癌或结肠癌的筛查检测,使用可风干粪便直扩qPCR /RT-qPCR 预混液能缩短检测开发的时间, 只需要加入 引物探针即可。 该产品既可以直接以液体形式使用,也可以风干成常温稳定的干燥型试剂使用, 避免昂贵复杂的冻干过程。

常见问答: 开发风干分子检测的重要基本原理

风干是通过蒸发过程移除反应液体中的水分。该过程需要使用精密的烘箱, 通过优化的干燥温度和时间来实现充分干燥。不同的反应预混液有不同的理想失水率,当失水率达到这个水平,表明干燥完成。 在相应的产品操作指南中我们推荐了对应的烘箱温度和干燥时间。但值得指出的是,许多因素会影响风干过程,如反应容器、反应液体积、风干批次的大小和预混液的最终配方(例如,是否添加了引物探针和添加了多少体积的引物探针),因此需要根据具体情况进行风干优化。

可以的, 我们建议根据不同的反应配方(比如说风干反应液是否含有引物探针,以及添加引物探针的体积)、使用的反应容器(孔板或试管)、风干批次大小等因素,优化烘箱温度和干燥时间。高温有可能会影响反应液及其组分的完整性,包括酶的活性。

理想情况下,风干MDX095 可风干一步法RT-qPCR预混液应移除70%的水分(仅对预混液进行风干时, 风干MDX082可风干qPCR预混液应移除95%的水分(仅对预混液进行风干时)。因此,每个检测反应需要优化风干设置来达到这个数值。如果水分残留过多可能会影响风干试剂的保质期,而过度干燥可能会使风干混合物很难复溶,因此导致性能下降。 失水率可以通过对比风干前后含有预混液的反应管重量来计算 (请参阅基本流程进一步了解相关信息)。此外,风干后必须要立即封装风干混合物。

风干试剂在添加样本后可在秒内迅速复溶。 建议加入样本后轻晃或震荡反应管使反应液充分混匀。

如果反应液被过度干燥,会导致酶的性能受到影响。理想的风干状态应该是达到建议的失水率,酶的性能依然不受影响。 如果风干试剂的Ct值延迟,这通常表明试剂被过度风干,干燥过程需要优化。

我们没有发现使用不同荧光探针 (Cy5, FAM, JOE 或ROX) 对风干试剂的性能产生影响。

我们在风干过程中没有观察到任何污染,但是强烈建议遵守良好的实验室清洁规范以减少可能的环境污染。例如,保持操作表面清洁、将做风干干燥、qPCR反应配置和数据分析的区域分开。此外,建议遵照制造商提供的说明维护清洁烘干箱。在干燥过程中,风扇产生的空气流动是否会将少量引物/探针从一个

我们没有观察到任何由空气流动造成风干过程中的交叉污染。风干混合物在试管底部,反应管之间发生交叉污染的可能性极小。此外,出于GMP规范原则,不建议将不同测试的反应液在同一烘干过程中同时进行干燥。

也可以使用其他反应容器,如板孔、小瓶或各种微芯片,但不同反应容器或检测的干燥条件需要优化。确定最佳干燥条件和参数后,需要进行验证,包括扩大生产规模。

我们建议使用精密烘箱(温度均匀性+/- 1.5°C),可以有鼓风或真空的功能。 在我们的测试中,使用了Memmerd UF260 Plus烤箱,风扇和风门的设置分别为100%和20%。请注意,不同的烘箱有不同的规格和可调参数,需要根据具体检测、风干液体积、反应容器类型、风干批次大小、相对湿度和海拔高度进行优化。

如果首次风干失败,没有达到正确的失水率,我们不建议把试管再放回烘箱继续风干或者加水延长风干。为了保证风干参数可控性和检测的可重复性,建议重新配置风干。除此之外,在风干完成前不建议在风干过程中打开烘箱门,因为会影响烘箱中温度等环境。

风干与冻干不同,因此失水率不会受环境影响。

当体系中引入任何变量时,如反应体积、反应容器、引物/探针或批次大小,我们建议分开测试。这将确保条件的可控性和结果的可复制性。

不。天平不需要靠近烤箱,只要盖上管盖,然后用天平测量即可,即使天平摆在另一个房间也可以。  

与我们的专业团队联系

想了解更多迈迪安免疫和分子产品信息?欢迎与我们联系


By submitting your information in this form, you agree that your personal information may be stored and processed in any country where we have facilities or service providers, and by using our “Contact Us” page you agree to the transfer of information to countries outside of your country of residence, including to the United States, which may provide for different data protection rules than in your country. The information you submit will be governed by our Privacy Statement.

公司简介

了解更多
Welcome to
logo blue

Please select your country to continue

Continue
EN