dTTP, 100mM, Lithium Salt

dNTPs是DNA的“积木”。 dNTPs的纯度和稳定性是PCR成功的两个关键因素。 特别推荐使用高度纯化的dNTP用于敏感的检测，如长PCR、RT-PCR、多重PCR、突变检测和实时应用。 当模板的起始量很小时，dNTPs的纯度也很重要。

PCR反应中每个dNTP的标准浓度为0.2 mM，如果起始原料是每个dNTP 100 mM的溶液，则需要在50µL的标准PCR反应中加入每个核苷酸0.1µL。 为了便于使用，建议准备混合液:如果将100mM dNTP库存溶液等摩尔混合，混合的浓度将为100mM或每个核苷酸的25mM。 从100x的库存，你需要添加0.5µL到50µL的反应。 迈迪安还提供更稀释的40mM混合物(每个10mM)，这是一个50倍的原液；以及10mM混合物(每个2.5 mM) ，10倍的工作原液。

视情况而定。 你可能可以提高DNA产量，但必须优化整个PCR反应，调整缓冲液，Mg2+等等。 这不仅仅是核苷酸的问题。

是的。 对于复杂的反应，如长模板扩增和实时PCR, dNTPs的质量尤为重要。

是的。 储存核苷酸的最佳pH值为pH 7.5-8.2 (20°C)。 酸性pH会导致dNTPs水解成dNDPs和dNMPs，不太适合PCR应用。 在冻融循环期间，dNTP溶液的pH值可能与20°C时的pH值不同。 锂盐溶液的pH值不像钠盐溶液那样依赖于温度，因此在使用锂盐的地方，当dNTP反复冻融时，pH值不会发生剧烈变化。 因此锂盐dNTP更稳定，比钠盐有更长的保质期。

dNTPs的酶法合成使用高度特异性的酶法系统，消除杂质和PCR抑制剂，如修饰的核苷酸、PPi和脱氧核苷四磷酸。 化学生产过程中产生的污染物，如痕量的dNDPs、焦磷酸盐或其他离子物种(如醋酸盐)，阻碍了PCR反应。 这种污染可能导致低产量或根本没有扩增产物。 除非彻底纯化，否则化学合成的dNTPs通常含有四磷酸脱氧核苷，这是强有力的PCR抑制剂。 化学合成也可以导致脱氨和其他核苷酸修饰，而酶法合成dNTPs可以绕过这些风险。

dNTPs在锂盐中的溶解度大于在钠盐中的溶解度，这一点早有人提到过。 此外，锂盐中的dNTP比钠盐中的dNTP更能抵抗反复的冻融。 此外，它们在整个储存期间都是无菌的(锂离子已被证明对各种微生物有显著的抑菌活性)。 最后，使用锂盐核苷酸制剂可以减少盐诱导的伪产物，增加测序凝胶的可读性。 锂盐非常适合PCR测序和标记应用。

我们的dNTP混合物的所有浓度都是合计的，例如，我们的100mMdNTP混合是由每个dNTP (dATP, dCTP, dGTP和dTTP)的25mM组成的。

当dUTP代替或与dTTP一起使用时，所得到的PCR产物是尿嘧啶DNA糖基化酶(UDGase)的合适底物，这允许用户在开始当前的扩增之前完全摧毁任何来自先前PCR反应的污染DNA。 我们提供dUTP作为独立产品和dUTP Mix的一部分。

我们建议您使用分子生物级别或PCR级水稀释您的dNTPs。