dUTP Mix, 50mM, Lithium Salt

dNTPs是DNA的“积木”。 dNTPs的纯度和稳定性是PCR成功的两个关键因素。 特别推荐使用高度纯化的dNTP用于敏感的检测，如长PCR、RT-PCR、多重PCR、突变检测和实时应用。 当模板的起始量很小时，dNTPs的纯度也很重要。

PCR反应中每个dNTP的标准浓度为0.2 mM，如果起始原料是每个dNTP 100 mM的溶液，则需要在50µL的标准PCR反应中加入每个核苷酸0.1µL。 为了便于使用，建议准备混合液:如果将100mM dNTP库存溶液等摩尔混合，混合的浓度将为100mM或每个核苷酸的25mM。 从100x的库存，你需要添加0.5µL到50µL的反应。 迈迪安还提供更稀释的40mM混合物(每个10mM)，这是一个50倍的原液；以及10mM混合物(每个2.5 mM) ，10倍的工作原液。

视情况而定。 你可能可以提高DNA产量，但必须优化整个PCR反应，调整缓冲液，Mg2+等等。 这不仅仅是核苷酸的问题。

是的。 对于复杂的反应，如长模板扩增和实时PCR, dNTPs的质量尤为重要。

Yes. The optimal pH for storage of nucleotides is from pH 7.5-8.2 (pH at 20 °C). An acidic pH will cause hydrolysis of dNTPs to dNDPs and dNMPs, rendering them less suitable for PCR applications. During freezing/thawing cycles, the pH of the dNTP solutions can differ from the pH at 20 °C. The pH for lithium salt solutions is not as temperature-dependent as with sodium salts, hence where lithium salts are used, no dramatic shifts in pH occur when dNTPs are repeatedly frozen and thawed. This results in the dNTP preparation being more stable and, consequently, having a much longer shelf life than with sodium salts.

dNTPs的酶法合成使用高度特异性的酶法系统，消除杂质和PCR抑制剂，如修饰的核苷酸、PPi和脱氧核苷四磷酸。 化学生产过程中产生的污染物，如痕量的dNDPs、焦磷酸盐或其他离子物种(如醋酸盐)，阻碍了PCR反应。 这种污染可能导致低产量或根本没有扩增产物。 除非彻底纯化，否则化学合成的dNTPs通常含有四磷酸脱氧核苷，这是强有力的PCR抑制剂。 化学合成也可以导致脱氨和其他核苷酸修饰，而酶法合成dNTPs可以绕过这些风险。

dNTPs在锂盐中的溶解度大于在钠盐中的溶解度，这一点早有人提到过。 此外，锂盐中的dNTP比钠盐中的dNTP更能抵抗反复的冻融。 此外，它们在整个储存期间都是无菌的(锂离子已被证明对各种微生物有显著的抑菌活性)。 最后，使用锂盐核苷酸制剂可以减少盐诱导的伪产物，增加测序凝胶的可读性。 锂盐非常适合PCR测序和标记应用。

我们的dNTP混合物的所有浓度都是合计的，例如，我们的100mMdNTP混合是由每个dNTP (dATP, dCTP, dGTP和dTTP)的25mM组成的。

当dUTP代替或与dTTP一起使用时，所得到的PCR产物是尿嘧啶DNA糖基化酶(UDGase)的合适底物，这允许用户在开始当前的扩增之前完全摧毁任何来自先前PCR反应的污染DNA。 我们提供dUTP作为独立产品和dUTP Mix的一部分。

我们建议您使用分子生物级别或PCR级水稀释您的dNTPs。