多重扩增
将无甘油高保真度Pfu酶(HC)冻干后在37°C下储存7天和28天,然后用于对7个靶标(793bp、649bp、548bp、418bp、332bp、196bp、135bp)的多重PCR扩增,相同液体体系用于参照对比,结果显示干燥后性能稳定,可用于常温储存,并用于NGS文库扩增。
无甘油高保真Pfu酶 (HC), MDX203
无甘油、高浓度、高保真 DNA 聚合酶,配有单独的稀释液和反应缓冲液,是 NGS 文库扩增和基因表达的理想选择。适合冻干。
文档与资源
产品描述
高保真度Pfu是一种耐热的高保真度DNA聚合酶,从毛球球菌中分离。Pfu聚合酶在镁离子存在时可沿5´→3´方向复制DNA。该酶同时具有3´→5´核酸外切酶(校对)活性,可迅速纠正在DNA复制过程中可能发生的错误,其错误率为3.0 x 10-6,产生长度高达5kb的钝端扩增子。无甘油高保真Pfu(HC)在无甘油储存缓冲液中提供,并配有5倍反应缓冲液,该缓冲液含有冷冻干燥所需的镁、dNTP和赋形剂。
产品介绍
描述 | 高浓度、高保真度Taq DNA聚合酶,带有单独的Pfu聚合酶稀释缓冲液和10x Pfu反应缓冲液 |
浓度 | 20 U/µL |
外观 | 透明液体 |
应用 | PCR, NGS 文库扩增,克隆,蛋白表达 |
样本类型 | cDNA, DNA |
产品样式 | 3 管 |
储存 | -20 °C |
稳定性 | 参见产品标签 |
一致性 | 测试样品和参考样品之间的±0.5 Ct差异 |
DNA污染 | 在大肠杆菌和小鼠基因组 DNA 特异靶标的 PCR 扩增中未检测到与阴性对照重叠的痕迹。 |
DNA酶/RNA酶污染 | 没有可检测到的降解 |
产品资料
分子诊断的原料试剂解决方案分子诊断的原料试剂解决方案
高特异性 Pfu HS 混合物Pfu高保真热启动聚合酶
下一代测序
Next Generation Sequencing (NGS)
建库分子酶下一代测序
Next Generation Sequencing (NGS)
建库分子酶
常见问答: 高保真Pfu
在自然界中,DNA聚合酶在DNA链延长过程中纠错核苷酸整合的能力对于个体生存至关重要。这被称为“校对活动”,发生在3′到5′方向。聚合酶的这种活性还能去除3'端(A-端)的未配对核苷酸,产生钝端。
如果可能的话,建议对受影响的样品进行清洗以尽可能移除抑制物,或者建议使用高特异性Pfu HS预混液(MDX006),该试剂更适合用于有抑制物存在的情况。
经验证,高保真Pfu HS可对长达5kb的模板进行扩增。
DNA靶标富集是测序前的DNA制备步骤,其中DNA序列被直接扩增(基于多重PCR)或捕获(基于混合捕获),然后可以使用DNA测序仪对这些富集的DNA片段进行测序。
如果正确储存在密封袋中,冻干的PCR分子检测试剂可在常温保持稳定长达2年。
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