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dNTP Mix, 40mM, Sodium Salt

该产品不在中国销售 A mix of ready-to-use general grade dNTPs containing dATP, dGTP, dCTP, and dTTP (40mM total), supplied as lithium salts in purified water at pH 7.5, enzymatically synthesized from quality raw materials, using highly specific production systems. The manufacturing process eliminates impurities and PCR-specific inhibitors such as modified nucleotides, tetraphosphates, and pyrophosphates commonly observed in other commercially available dNTP products (>99% purity determined by quantitative HPLC). Lithium salts have greater resistance to repeated freezing and thawing cycles than sodium salts, and lithium salt dNTP preparations remain sterile over the entire shelf-life due to the bacteriostatic activity of lithium towards various microorganisms.

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dNTP Mix, 40mM, Sodium Salt, MDX083

Available in 10 mL or larger aliquots (please enquire)

dNTP Mix, 40mM, Sodium Salt achieves high dNTP quality, with minimal batch-to-batch variations. They are manufactured to the highest standards and are perfectly suited for even the most demanding applications, such as Long PCR or highly sensitive qPCR.

FAQs

dNTPs是DNA的“积木”。 dNTPs的纯度和稳定性是PCR成功的两个关键因素。 特别推荐使用高度纯化的dNTP用于敏感的检测,如长PCR、RT-PCR、多重PCR、突变检测和实时应用。 当模板的起始量很小时,dNTPs的纯度也很重要。

PCR反应中每个dNTP的标准浓度为0.2 mM,如果起始原料是每个dNTP 100 mM的溶液,则需要在50µL的标准PCR反应中加入每个核苷酸0.1µL。 为了便于使用,建议准备混合液:如果将100mM dNTP库存溶液等摩尔混合,混合的浓度将为100mM或每个核苷酸的25mM。 从100x的库存,你需要添加0.5µL到50µL的反应。 迈迪安还提供更稀释的40mM混合物(每个10mM),这是一个50倍的原液;以及10mM混合物(每个2.5 mM) ,10倍的工作原液。

视情况而定。 你可能可以提高DNA产量,但必须优化整个PCR反应,调整缓冲液,Mg2+等等。 这不仅仅是核苷酸的问题。

是的。 对于复杂的反应,如长模板扩增和实时PCR, dNTPs的质量尤为重要。

是的。 储存核苷酸的最佳pH值为pH 7.5-8.2 (20°C)。 酸性pH会导致dNTPs水解成dNDPs和dNMPs,不太适合PCR应用。 在冻融循环期间,dNTP溶液的pH值可能与20°C时的pH值不同。 锂盐溶液的pH值不像钠盐溶液那样依赖于温度,因此在使用锂盐的地方,当dNTP反复冻融时,pH值不会发生剧烈变化。 因此锂盐dNTP更稳定,比钠盐有更长的保质期。

dNTPs的酶法合成使用高度特异性的酶法系统,消除杂质和PCR抑制剂,如修饰的核苷酸、PPi和脱氧核苷四磷酸。 化学生产过程中产生的污染物,如痕量的dNDPs、焦磷酸盐或其他离子物种(如醋酸盐),阻碍了PCR反应。 这种污染可能导致低产量或根本没有扩增产物。 除非彻底纯化,否则化学合成的dNTPs通常含有四磷酸脱氧核苷,这是强有力的PCR抑制剂。 化学合成也可以导致脱氨和其他核苷酸修饰,而酶法合成dNTPs可以绕过这些风险。

dNTPs在锂盐中的溶解度大于在钠盐中的溶解度,这一点早有人提到过。 此外,锂盐中的dNTP比钠盐中的dNTP更能抵抗反复的冻融。 此外,它们在整个储存期间都是无菌的(锂离子已被证明对各种微生物有显著的抑菌活性)。 最后,使用锂盐核苷酸制剂可以减少盐诱导的伪产物,增加测序凝胶的可读性。 锂盐非常适合PCR测序和标记应用。

我们的dNTP混合物的所有浓度都是合计的,例如,我们的100mMdNTP混合是由每个dNTP (dATP, dCTP, dGTP和dTTP)的25mM组成的。

当dUTP代替或与dTTP一起使用时,所得到的PCR产物是尿嘧啶DNA糖基化酶(UDGase)的合适底物,这允许用户在开始当前的扩增之前完全摧毁任何来自先前PCR反应的污染DNA。 我们提供dUTP作为独立产品和dUTP Mix的一部分。

我们建议您使用分子生物级别或PCR级水稀释您的dNTPs。

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