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框架

RNase 抑制剂

核糖核酸酶(RNA酶,RNase)无处不在,可以通过多种方式进入到实验中。例如,RNA分离过程中的共纯化,从手上或移液管尖端携带。这种RNase污染通常会被忽视。RNase抑制剂是灵敏的RNA检测(例如RT-qPCR)的理想选择,因为即使少量RNase也可能对检测结果产生影响。迈迪安的RNase抑制剂是广谱真核RNase的高效抑制剂,对聚合酶或逆转录酶活性没有抑制作用,因此可用于cDNA合成或一步法PCR或定量PCR反应。

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迈迪安的核糖核酸酶抑制剂(RNA酶抑制剂)

  • 抑制广谱的真核RNA酶,包括RNA酶A,B和C

  • 无DNA酶、RNA酶,磷酸酶和切口酶污染,提高样本安全性

  • 对DTT浓度和pH值兼容性高,活性高达55°C

  • 与冻干兼容常温储运的检测

逆转录中RNA酶抑制剂的作用

RNase Inhibitor graph

Meridian RNase Inhibitors are highly efficient inhibitors of a broad spectrum of eukaryotic RNases and shows no inhibition of polymerase or reverse transcriptase activity, so can be used in cDNA synthesis or one-step PCR or quantitative PCR reactions.

对HeLa细胞总RNA(1 μg - 0.075 μg)在RNA酶抑制剂存在(泳道1-5)和不存在(泳道7-11)的情况下进行逆转录,然后在标准PCR条件下对血管紧张素II受体基因的1 kb片段靶标进行扩增。在存在或不存在RNA酶抑制剂的情况下,PCR产物没有可检测到的差异,表明添加RNA酶抑制剂不会干扰cDNA合成过程中逆转录酶的功能。

RNase Inhibitor, MDX056

Available in 250 µL (10,000 Units) or 2.5 mL (100,000 Units) aliquots

RNase Inhibitor (Glycerol Free), MDX120

Available in 100 µL (4,000 Units) or 500 µL (20,000 Units) aliquots

产品描述

迈迪安的RNA酶抑制剂来自重组蛋白,该蛋白通过以1:1的比例非共价结合来抑制不同的RNA酶(A,B,C)。它们的关联常数为1014 M,可用于RNA酶存在潜在问题的任何应用。通过SDS-PAGE检测RNA酶抑制剂的活性和纯度,其不存在核酸内切酶,切口酶和核酸外切酶活性。无甘油RNA酶抑制剂与冻干兼容。


产品介绍

描述 抑制不同核糖核酸酶(A,B,C)的重组核糖核酸酶抑制剂蛋白
来源 携带RNase抑制剂基因的大肠杆菌菌株
分子量 50 kDa
浓度 40 U/µL
关联常数 1014 M
参数 25 – 55 °C 最佳反应温度
pH值范围 5.0 – 8.0
外观 透明液体
应用 RNA纯化,cDNA合成。RT-PCR,RT-qPCR,体外转录/翻译,RNA测序,RNase保护测定,酶促RNA标签反应
样本类型 RNA
产品样式 1管
储存 -20 °C (-80 °C for MDX120)
稳定性 参见产品标签
抑制 与RNase抑制剂和RNA酶A的浓度梯度孵育的总RNA,在琼脂糖凝胶上未观察到降解
DNA污染 在大肠杆菌和小鼠基因组 DNA 特异靶标的 PCR 扩增中未检测到与阴性对照重叠的痕迹。
DNA酶/RNA酶污染 没有可检测到的降解

常见问答: RNA酶抑制剂

RNA酶抑制剂通常用作RNA酶促反应中的预防措施,以抑制和控制此类污染物。少量RNA酶抑制可以与分离的RNA共纯化或从环境中引入并影响下游应用。

是的,为了安全起见强烈建议在所有逆转录反应中使用RNA酶抑制剂,因为RNA酶几乎无处不在,并且在RNA制备和反应设置过程中很容易污染样品。即使是微量的RNA酶也会讲解RNA,导致cDNA产物缩短,产量低,RT-PCR灵敏度降低。

不可以,RNA酶抑制剂是一种蛋白质,在较高温度下会变性。

是的,大多数RNA酶抑制剂需要还原条件才能正常工作,如果缓冲液不含DTT,RNA酶抑制剂将不起作用。为了获得最佳的RNA酶抑制剂,需要终浓度为1 mM DTT。

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